熒光素酶檢測實驗
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Luciferase報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的實驗。熒光素底物會在熒光素酶作用下會發(fā)光（波長540-600nm），且光強能反應熒光素酶的表達量。熒光素酶的蛋白表達量與啟動子活性、mRNA的穩(wěn)定性及翻譯效率相關(guān)。從而將待測啟動子、UTR等序列與熒光素酶ORF框融合表達，再檢測其發(fā)光強度，就能判斷這些序列對蛋白表達的影響。
為了減少實驗誤差，同時轉(zhuǎn)染一個能穩(wěn)定表達的腎熒光素酶的質(zhì)粒作為內(nèi)參，催化腔腸素氧化產(chǎn)生藍光（波長460-540nm）；所以叫雙熒光素酶報告基因檢測。
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1. 重組載體：質(zhì)粒不少于2ug，或甘油菌約100ul
2. 細胞：活細胞，2個T25瓶，細胞匯合度＞80%（廣州市內(nèi)）；或凍存細胞2管（廣州外地區(qū)）
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1. 質(zhì)?；蚋视途捎帽４孢\輸；
2. 活細胞常溫取樣；
3. 凍存細胞干冰取樣/運輸：需要至少在送樣前一天通知我方。
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